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雙熒光素酶檢測【啟動子活性分析】
雙熒光素酶檢測【miRNA對靶基因調控研究】
 
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microRNA研究攻略

   MicroRNA (miRNA) 是一類由內源基因編碼的長度約為22 個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,它們在動植物中參與轉錄后基因表達調控。microRNA的表達、抑制或過表達對于研究基因功能有重要的意義。目前信諾金達對于microRNA研究相關的服務如下:

1. microRNA qPCR定量檢測

檢測microRNA的差異表達,各種無傳染性致病性樣品均可提供(如果是這里樣品,請提供總RNA或小RNA)。提供登錄號(http://www.mirbase.org/ )或microRNA序列。我們出具詳細實驗報告,莖環法或加尾法反轉錄均可選擇,服務的連接如下:

miRNA熒光定量PCR

2. microRNA載體構建

動物或植物microRNA的過表達載體或抑制表達載體均可構建。過表達載體可以表達pre-miRNA或atmiRNA;抑制表達可以合成miRNA inhibitor或構建STTM的抑制表達載體,詳細介紹,請點擊下面鏈接:

植物miRNA過表達/抑制表達載體構建

動物miRNA載體構建

3. microRNA靶位點結合預測及雙熒光素酶載體構建,熒光素酶檢測

miRNA通過堿基互補配對的方式識別靶基因的3’UTR區,并根據互補程度的不同指導沉默復合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。根據軟件或數據庫預測靶位點及構建靶位點的熒光素酶載體并檢測。詳細介紹,請點擊下面鏈接:

雙熒光素酶報告基因檢測【miRNA對靶基因調控研究】

4. microRNA轉染細胞后,靶基因的表達檢測

細胞培養,mimics或inhibitors轉染,或表達,抑制載體轉染,檢測下游基因的mRNA表達或蛋白水平的表達,或蛋白之間的互作:

細胞培養、模型建立、功能分析技術服務

熒光定量PCR(qPCR)實驗技術服務

Western Blot

IP 和Co-IP

參考文獻

1.Kluiver J, Gibcus JH, Hettinga C, Adema A, Richter MKS, et al. (2012) Rapid Generation of MicroRNA Sponges for MicroRNA Inhibition. PLoS ONE 7(1): e29275. doi:10.1371/journal.pone.0029275

2.Tang G, Yan J, Gu Y, Qiao M, Fan R, Mao Y, Tang X. (2012) Construction of short tandem target mimic (STTM) to block the functions of plant and animal microRNAs. Methods 58(2):118-25.

更多服務詳情,或實驗設計等整體服務,敬請發送到info@sinogenesci.com或電話咨詢信諾金達技術部,咨詢電話:010-56545250 技術支持QQ: 78001304

 

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